Técnicas biológicas, serológicas y moleculares para la detección asintomática de Xanthomonas axonopodis pv. citri

Resumo

Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) produce cancro cítrico en todas las especies cítricas comerciales. La bacteria puede diseminarse mediante material vegetal de propagación contaminado y asintomático. Con el objetivo de optimizar técnicas de detección de bacterias para el análisis de rutina de material vegetal cítrico asintomático, se compararon las técnicas ELISA, Inmunoflorescencia, PCR, qRT_PCR e inoculación en plantas indicadoras (bioensayo). Las pruebas se realizaron a partir de diluciones al décimo entre 10⁸ ufc.mL^-1 y 10² ufc.mL^-1 de un cultivo puro de cepa 49b. El nivel de detección obtenido fue de 1,8 x 10² ufc. mL^-1 utilizando inmunoflorescencia, 1,8x10⁴ ufc.mL^-1 con ELISA indirecto, 1,8x10³ ufc. mL^-1 mediante la técnica de PCR, 10 ufc. mL^-1 a través de qRT_PCR, y 230 ufc.mL ^-1 en plantas inoculadas de naranjo amargo. En base a estos resultados y teniendo en cuenta que para el análisis masivo de muestras es importante además de la sensibilidad, el costo y la practicidad, las técnicas de PCR e inoculación en plantas hospedero fueron las que reunieron las mejores características para ser evaluadas en material vegetal asintomático.